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[1]陈 丹,王小东,童静植,等. 三种分离人外周血单核细胞方法的比较[J].天津医科大学学报,2014,20(06):483-485.
　CHEN Dan,WANG Xiao-dong,TONG Jing-zhi,et al.Comparison of three methods of separating human peripheral blood mononuclear cells [J].Journal of Tianjin Medical University,2014,20(06):483-485.
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 三种分离人外周血单核细胞方法的比较(PDF)
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《天津医科大学学报》[ISSN:1006-8147/CN:12-1259/R]

卷:
20卷
期数:
2014年06期
页码:
483-485
栏目:
技术与方法
出版日期:
2014-11-20

文章信息/Info

Title:

Comparison of three methods of separating human peripheral blood mononuclear cells

文章编号:
1006-8147（2014）06-0485-03
作者:
陈 丹1 ; 王小东2 ; 童静植2 ; 丁 文2 ; 孙 科2 ; 何景华1 ; 强兆艳1 ;  李 光3 ; 康 毅1
 （天津医科大学1.基础医学院药理学教研室；2. 2009级临床医学七年制；3.基础医学院生物学教研室，天津300070）
Author(s):

 CHEN Dan1; WANG Xiao-dong2; TONG Jing-zhi2; DING Wen2; SUN Ke2; HE Jing-hua1;  QIANG Zhao-yan1; LI Guang3; KANG Yi1

(1.Department of Pharmacology; 2.Clinical Seven-years Students, Grade 2009; 3.Department of Biology, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China)
关键词:
 ; 单核细胞; 贴壁法; 免疫磁珠; 流式细胞术
Keywords:
monocyte;  adherent separation method;  immune magnetic beads separation;  flow cytometry separation
分类号:
R446
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
 目的：用3种方法从人外周血分离单核细胞，比较细胞纯度、得率、实验成本及所需时间，选择最适宜的分离方法。方法：用密度梯度离心法获得外周血的单个核细胞，分别用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法进一步分离单核细胞。经CD14抗体标记，用流式细胞术检测细胞纯度，计算细胞得率、实验成本及所需时间。结果：用贴壁法、免疫磁珠法和流式细胞术法分离单核细胞，细胞纯度分别为18.8%、80%和73.4%；细胞得率为5%、11%和7.5%；每获得2×107个单核细胞，实验成本约500元、1 500元和2 100元，实验耗时约6 h、6 h和10 h。结论：免疫磁珠法是最适宜的分离人外周血单核细胞的方法，具有细胞纯度与得率较高，实验成本较低，耗时较短的优点。
Abstract:
Objective: To separate monocyte from human peripheral blood based on cell purity, cell yield rate, experiment cost and the time required. Methods: Peripheral blood mononuclear cells were obtained via density gradient centrifugation method. Then the adherent method, immune magnetic beads method and flow cytometry method were used to separate monocyte from peripheral blood mononuclear cells. Cell purity was detected by flow cytometry after being marked with CD14 monoclonal antibody. Cell yield rate, experiment cost and the time required were calculated. Results: The cells purity was 18.8% by adherent method while cells purity was 80% and 73.4% respectively indicated by immune magnetic beads and flow cytometry methods. The cell yield rates were 5%, 11% and 7.5%, respectively. The experiment costs were about 500 yuan, 1500 yuan and 2100 yuan every 2×107 mononuclear cells while the time required for experiment were about 6 h, 6 h and 10 h, respectively. Conclusion: Immune magnetic beads method is the most appropriate method to separate monocyte, with the advantages of higher cell purity and yield rate, lower experiment cost and shorter time as compared with other methods.

参考文献/References:

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备注/Memo

备注/Memo:

基金项目 国家高新技术研究发展计划（863计划）第八课题组子课题（NO.2012AA021003）

作者简介 陈丹（1980-），女，副教授，博士，研究方向：中药药理学；通信作者：李光，E-mail:lig@tijmu.edu.cn，康毅， E-mail：13902075982@163.com。



更新日期/Last Update: 2014-12-03