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[1]高宇星,李澍妶,周春雷,等.KPNB1抑制剂在小鼠移植排斥反应中的作用研究[J].天津医科大学学报,2025,31(01):47-53.[doi:10.20135/j.issn.1006-8147.2025.01.0047]
　GAO Yuxing,LI Shuxuan,ZHOU Chunlei,et al.Study on the role of KPNB1 inhibitor in mouse transplant rejection[J].Journal of Tianjin Medical University,2025,31(01):47-53.[doi:10.20135/j.issn.1006-8147.2025.01.0047]
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KPNB1抑制剂在小鼠移植排斥反应中的作用研究(PDF)
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《天津医科大学学报》[ISSN:1006-8147/CN:12-1259/R]

卷:
31卷
期数:
2025年01期
页码:
47-53
栏目:
基础医学
出版日期:
2025-01-20

文章信息/Info

Title:
Study on the role of KPNB1 inhibitor in mouse transplant rejection
文章编号:
1006-8147(2025)01-0047-07
作者:
高宇星1; 李澍妶2; 周春雷2; 穆红2
（1.天津医科大学一中心临床学院，天津 300192；2.天津市第一中心医院临床检验科，天津 300192）
Author(s):
GAO Yuxing1; LI Shuxuan2; ZHOU Chunlei2; MU Hong2
（1.The First Central Clinical School， Tianjin Medical University， Tianjin 300192， China；2.Department of Clinical Laboratory， Tianjin First Central Hospital， Tianjin 300192， China）
关键词:
INI-43; 核转运蛋白β1; 活化T细胞核因子; T细胞活化; 移植排斥
Keywords:
INI-43;  KPNB1;  NFAT; T cell activation;  transplantation rejection
分类号:
R446.1
DOI:
10.20135/j.issn.1006-8147.2025.01.0047
文献标志码:
A
摘要:
目的：探讨核转运蛋白β1（KPNB1）抑制剂入核抑制因子43（INI-43）在小鼠移植排斥反应中的作用。方法：首先进行体外实验，将Jurkat T细胞分为4组：空白组、活化对照组、INI-43低剂量组和INI-43高剂量组；染色质免疫共沉淀技术检测INI-43对活化T细胞核因子（NFAT）与白细胞介素（IL）-2启动子结合水平的作用；双荧光素酶检测INI-43对IL-2启动子报告基因转录活性的影响。而后进行动物实验，将小鼠分为5组：假手术组、模型对照组、环孢素A（CsA）组、INI-43低剂量组和INI-43高剂量组，对实验小鼠进行皮肤移植手术，记录移植物的存活时间；流式细胞技术检测INI-43对小鼠T细胞表面活化分子CD25、CD107a的抑制情况；酶联免疫吸附试验测定小鼠外周血IL-2和干扰素（IFN）-γ水平。结果：Western印迹显示，与活化对照组相比，INI-43低剂量和INI-43高剂量组细胞核内NFAT含量均减少（Z=-1.96、t=20.88，均P<0.05），细胞核内NFAT与IL-2启动子的结合水平均降低（t=5.72、12.51，均P<0.01）。与活化对照组相比，INI-43低剂量和INI-43高剂量组野生型IL-2启动子报告基因转录活性降低（t=12.69、27.30，均P<0.001）；移植物的存活时间延长（Z=-3.71、-3.89，均P<0.001）。与模型对照组相比，INI-43高剂量组T细胞CD25的表达水平下降（t=2.10，P<0.05）；INI-43低剂量和INI-43高剂量组CD107a（Z=-3.40、-3.78，均P<0.01）、外周血IL-2（t=5.35、9.07均P<0.01）、IFN-γ（t=6.16、6.81，均P<0.01）的表达水平均下降。结论：KPNB1抑制剂INI-43能够抑制NFAT跨核转运，抑制移植术后小鼠体内T细胞的活化，缓解排斥反应。
Abstract:
Objective： To investigate the role of inhibitor of nuclear import-43 （INI-43） as a karyopherin beta 1 （KPNB1） inhibitor in mouse transplant rejection. Methods： Firstly， in vitro experiments were conducted to divide Jurkat T cells into four groups： blank group， activated control group， INI-43 low-dose group， and INI-43 high-dose group； Chromatin immunoprecipitation technique was used to detect the effect of INI-43 on the binding level of nuclear factor of activated T cells（NFAT） and interleukin-2（IL-2） promoter； Dual luciferase assay was used to detect the effect of INI-43 on the transcriptional activity of IL-2 promoter reporter genes. Subsequently， animal experiments were conducted to divide the mice into five groups： sham surgery group， model control group， cyclosporine A （CsA） group， low-dose INI-43 group， and high-dose INI-43 group. Skin transplantation surgery was performed on the experimental mice， and the survival time of the transplant was recorded； Flow cytometry was used to detect the inhibitory effect of INI-43 on the surface activation molecules CD25 and CD107a of mouse T cells； Enzyme linked immunosorbent assay was used to measure the levels of IL-2 and interferon gamma （IFN-γ） in peripheral blood of mice. Results： Western blotting showed that compared with the activated control group， the levels of NFAT in the nuclear of both low dose and high dose INI-43 groups decreased（Z=-1.96， t=20.88， both P<0.05）， and the binding levels of NFAT and IL-2 promoter in the nuclei decreased（t=5.72， 12.51， both P<0.01）. Compared with the activated controlgroup， the transcription activity of the wild-type IL-2 promoter reporter gene was reduced in the low-dose and high-dose INI-43 groups （t=12.69， 27.30， both P<0.001）. The survival time of the transplant was prolonged（Z=-3.71， -3.89， both P<0.001）. Compared with the model control group， the expression level of T cell CD25 decreased in the high-dose INI-43 group（t=2.10， P<0.05）. The expression levels of CD107a （Z=-3.40， -3.78， both P<0.01）， IL-2 （t=5.35， 9.07， both P<0.01） and IFN-γ （t=6.16， 6.81， both P<0.01） in peripheral blood in the low-dose and high-dose INI-43 groups decreased. Conclusion： KPNB1 inhibitor INI-43 can inhibit NFAT transnuclear transport， suppress T cell activation in transplanted mice， and alleviate rejection reactions.

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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:
基金项目：天津市医学重点学科（专科）建设资助项目（TJYXZDXK-015A）
作者简介：高宇星（2000-），女，硕士在读，研究方向：医学技术；通信作者：穆红，E-mail：tjyzxshen@163.com。
更新日期/Last Update: 2025-02-10