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[1]冯婧文,杨少斌,王兆松,等.不同固定剂及渗透方法对免疫荧光技术中EGFR内吞转运观察效果的影响[J].天津医科大学学报,2015,21(03):264-267.
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不同固定剂及渗透方法对免疫荧光技术中EGFR内吞转运观察效果的影响(PDF)
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《天津医科大学学报》[ISSN:1006-8147/CN:12-1259/R]

卷:
21卷
期数:
2015年03期
页码:
264-267
栏目:
技术与方法
出版日期:
2015-05-20

文章信息/Info

Title:
-
文章编号:
1006-8147（2015）03-0264-04
作者:
冯婧文; 杨少斌; 王兆松; 赵文铖; 肖春花
(天津医科大学肿瘤医院肿瘤细胞生物学实验室, 国家肿瘤临床医学研究中心 ,天津市“肿瘤防治”重点实验室,天津 300060)
Author(s):
-
关键词:
细胞免疫荧光; 固定剂; 渗透剂; 荧光显微镜; 表皮生长因子受体
Keywords:
-
分类号:
Q503
DOI:
-
文献标志码:
A
摘要:
目的：探索适合表皮生长因子受体（EGFR）内吞转运免疫荧光观察的固定和渗透方法。方法：采用OLYMPUS BX61荧光显微镜及成像系统，对不同固定剂（4%多聚甲醛，甲醇，4%多聚甲醛+甲醇，丙酮，丙酮与甲醇体积比1:1的混合液）配合不同渗透方法(0.04% saponin,0.1% TritonX-100)得到的EGF刺激后0 min和15 min两个时间点的EGFR免疫荧光图像进行对比分析。结果：0 min时EGFR主要定位于细胞质膜，4%多聚甲醛+甲醇的固定方法，配合使用0.04% saponin，可以观察到细胞膜上明显、清晰、连续的EGFR信号。针对EGF刺激15 min后内吞进入细胞的EGFR，不同固定方法对观察效果没有明显影响。但与配合使用0.04% saponin相比，0.1% TritonX-100进行渗透能充分暴露EGFR在细胞核内的信号。结论：温和的固定和渗透方法可获得较好的EGFR膜定位信号。针对内吞转运中的EGFR需要较强的渗透剂，以确定EGFR在细胞内准确的定位。
Abstract:
-

参考文献/References:

[1] Paez J G, Janne P A, Lee J C, et al. EGFR mutations in lung cancer: correlation with clinical response to gefitinib therapy[J]. Science, 2004,304(5676): 1497
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[3] Serrano M J, Ortega F G, Alvarez-Cubero M J, et al., EMT and EGFR in CTCs cytokeratin negative non-metastatic breast cancer[J]. Oncotarget, 2014,5(17): 7486
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[5] Henriksen L, Grandal M V, Knudsen S L, et al. Internalization mechanisms of the epidermal growth factor receptor after activation with different ligands[J]. PLoS One, 2013,8(3): e5814
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相似文献/References:

备注/Memo

备注/Memo:

作者简介 冯婧文（1984-），女，硕士在读，研究方向：生物化学与分子生物学；

通信作者：肖春花，E-mail：xxcchh2002@163.com。

更新日期/Last Update: 2015-05-27